揭秘！圆环基因工程苗如何借腹生子

新牧网报道（记� 李丹）猪圆环病毒病是猪的一种免疫抑制性疾病，分为两个血清型：PCV1和PCV2，猪群感染非常普遍，除本身造成损失外，还易继发其他疾病如猪蓝耳病、副猪嗜血杆菌病。圆环病毒对外界抵抗力强，传播广泛，很难消灭。我国目前发病异常严重，该病不仅能引起仔猪发病出现PMWS,还能引起保育猪和育肥猪皮炎肾病综合征。还会对母猪的生殖系统产生影响，从而导致母猪的生产性能低下、�/p>

揭秘！圆环基因工程苗如何借腹生子

亚单位疫苗安全高效应激導�/strong>

至今为止，疫苗免疫是防控圆环病毒唯一手段，但是要取得很好的防疫效果，首先要选择安全性好、高效持久的疫苗，进行合理的免疫。而基因工程亚单位疫苗，安全高效，应激小，是猪圆环防疫的未来和方向。目前世界上主要的养猪生产国美国、加拿大等基本上都是用亚单位疫苗控制猪圆环病、�/p>

目前国内外圆环疫苗主要分为灭活疫苗和亚单位疫苗两种。灭活疫苗是使病毒完全失�?没有侵染�?但仍然有抗原�?刺激机体产生抗体,安全性高,但此方法需要多次进行机体免�?且该病毒在细胞上增殖滴度很低，因此此疫苗效果不佳、�/p>

亚单位疫苗是利用微生物的某种表面结构成分制成不含有核�?但能诱发机产生抗体的疫苗。当� PCV2 亚单位疫苗多采用大肠杆菌、杆状病毒或酵母表达系统、�/p>

历经基因改造、发酵工程、蛋白提取而成

青岛易邦在国内首先应用大肠杆菌表达系统生产PCV2亚单位疫苗—易圆净，“易圆净”是国际上第一个采用大肠杆菌表达系统表达的且具有病毒样颗粒（VLPS）抗原结构的兽用疫苗。大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、安全性好、目的基因表达水平高、培养周期短、易于放大生产等特点，适用于中小分子量的蛋白表达。该表达系统能精确生产出具有良好免疫原性的圆环病毒蛋白（CAP/ VLPs），不仅能产生很好的细胞免疫还能产很好的中和抗体，从而兼顾紧急接种和长期保护的双重功效、�/p>

易圆净的生产集合了基因工程、发酵工程、蛋白提取工程三大工程的成果，首先利用基因工程构建工程菌，然后利用发酵工程实现工程菌高密度发酵培养与诱导，实现了目的蛋白的高效可溶性表达，蛋白提取对表达产物进行多级纯化和杂质或异物的除去、�/p>

大肠杆菌是一种最常使用的蛋白质高效表达原核宿主菌。但是，PCV2的Cap蛋白编码序列ORF2中含有高比例的稀有密码子，而且在序列的N端有个核定位信号区，在该区域里稀有密码子成簇分布，会严重影响蛋白的表达量,甚至提前终止翻译。因�?在构� 0RF2全基因克隆载体的基础上利用基因工程手段将该基因进行了剪切和修饰、�/p>

另外大肠打菌诱导表达外源PCV2的cap蛋白多以包涵体的形式存在,包涵体是由于大肠杆菌过表�?表达的速率过快,没有足够时间再折�?二硫键没有正确的配对,不能形成正确的构�?产生不溶解的现象,这也是许多专家Cap蛋白表达失败的原因之一，易邦公司在研发过程中对表达条件进行优化。从表达菌株,更改密码�?更改诱导条件等几个方面进行系统优化后Cap蛋白可溶性表达、�/p>

抗原含量稳定易检� 配以水佐剂易免疫

最终，表达的Cap蛋白形成了在电子显微镜下可见的病毒样颗粒（VLPS�?这与商品化的人用戊型肝炎VLP疫苗达到了同样的效果。病毒样颗粒抗原（VLPS）有以下特点９�/p>

1、表达的病毒样颗粒抗原（VLPS）与天然的病毒有着极其相似的形态和空间结构，具有很强的免疫原性，但不含有核酸，无感染性，非常安全、�/p>

2、表达的病毒样颗粒抗原（VLPS）进入机体后，它可通过与病毒自然感染一样途径来刺激机体的免疫系统，能高效诱导机体产生很强体液和细胞免疫、�/p>

3、表达的病毒样颗粒抗原（VLPS）稳定性好，不易失活，在蛋白提纯处理过程中仍保持完整的病毒样颗粒和抗原性。同时易圆净商品苗的抗原含量高达�?00ug/ml，抗原含量真实，简单易测、�/p>

猪群攻毒保护试验证明，对5个批次的猪群攻毒后免疫组化试验（IHC)和荧光定量PCR（Real-time PCR )均表明该疫苗的保护率可达100%。临床试验证明易圆净免疫�?5-20�?00%转阳，持续时间可�?个月、�/p>

佐剂对疫苗毒效果也有重大影响，目前的全病毒灭活苗均采用油性佐剂，存在不同程度的应激。而易圆净采用水性佐剂，安全性高、注射方便、无副反应，同时加入免疫增效剂COPOLYTM能显著增强机体的细胞免疫效果，真正实现了体液免疫和细胞免疫的双重功效、�/p>

历经5年的研发，易圆净的生产工艺可谓登峰造极、炉火纯青。自易圆净推出至今1000多万头猪临场使用表明:易圆净安全、高效、无副作用，免疫猪各项生产性能良好。只需一针，保护至出栏、�/p>

南方农村报、农财宝典、新牧网原创稿件文图，版权所有，未经书面授权，严禁转载、摘编或建立映像。违者将被追究法律责任。编辑部电话020-83003429

更多有关Բ��

• 

  如何评估猪圆环病毒疫苗的效果？免疫后还能检测到PCV2，为何？

  新牧网报道（记� 李丹）猪圆环病毒病是猪的一种免疫抑制性疾病，分为两个血清型：PCV1和PCV2，猪群感染非常普遍，除本身造成损失外，还易继发其他疾病如猪蓝耳病、副猪嗜血杆菌病。圆环病毒对外界抵抗力强，传播广泛，很难消灭。我国目前发病异

  2019-11-08 08:45:00
• 

  新牧网报道（记� 李丹）猪圆环病毒病是猪的一种免疫抑制性疾病，分为两个血清型：PCV1和PCV2，猪群感染非常普遍，除本身造成损失外，还易继发其他疾病如猪蓝耳病、副猪嗜血杆菌病。圆环病毒对外界抵抗力强，传播广泛，很难消灭。我国目前发病异

  2019-11-07 08:50:00

新牧网报道（记� 李丹）猪圆环病毒病是猪的一种免疫抑制性疾病，分为两个血清型：PCV1和PCV2，猪群感染非常普遍，除本身造成损失外，还易继发其他疾病如猪蓝耳病、副猪嗜血杆菌病。圆环病毒对外界抵抗力强，传播广泛，很难消灭。我国目前发病异

2019-11-06 08:50:00