石蛙人工繁殖技术

  1. 人工催产的设备与器材

(1)苗房建造 苗房四周用砖砌水泥抹面，墙高为1.5米，顶高为3.0米，上盖白色玻璃钢瓦，以保持充足的光线，育苗室要用水泥铺地，以利于流水操作，建房面积按生产规模而定，一般每1平方米面积可生产2万尾小蝌蚪苗。 (2)育苗架 木质结构，高为70厘米，宽为40厘米，长度视苗房大小、形状而定。 (3)育苗盘 白色硬塑盘，规格为39.5厘米×57.5厘米×11.5厘米(内径)。 (4)孵化筛 自制木框架，内拉紧一张尼龙纱窗布(规格为80～100目/平方厘米)，框架规格为31.5厘米×51.5厘米×3.0厘米。 (5)自动控温 电热棒控温范围为16～32℃，每个育苗盘需配备1把。 (6)授精皿 (圆形)直径为5厘米，或用搪瓷小碟子(白色)代替，直径为8厘米。 (7)注射器 注射用针为6～7号针头，以小针为宜，各备若干套。 (8)镊子 要求尖细、弹性强的不锈钢小镊子，长度不超过15厘米。 (9)沉淀、蓄水两用池 砖砌水泥结构，水容量为1～2吨。 (10)其他 温度表、吸管、拉污布、精液处理布、激素药品等。     2. 人工催产的药物     蛙类常用催产药物有绒毛膜促性腺激素(HCG)、促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)和蛙脑垂体。     催产药物的使用分为单一使用和混合使用。单一使用时。一般按每1000克体重的雌蛙用绒毛膜促性腺激素1200国际单位，或注射促黄体生长素释放激素类似物25～30微克，或15～20个蛙脑垂体。雄蛙的脑垂体催产效力比雌蛙的差。根据不同情况灵活掌握。若希望尽快产卵，则脑垂体用量应多些：反之，则应少些。混合使用时，则采用6～8个脑垂体，并加LRH-A25微克或HCG600国际单位混合进行注射。一般混合注射效果比单一使用效果要好。由于雄蛙精巢内常年有成熟的精子，一般不需要注射激素，但为了使雌雄蛙同步抱对，可给雄蛙注射雌蛙一半的剂量。     3. 催产药物的稀释液 (1)任氏液的配制 氯化钠6.5克，氯化钾0.4克，氯化钙0.12克，碳酸氢钠0.2克，磷酸二氢钠0.01克，葡萄糖2克，蒸馏水加至1000毫升。氯化钙先配成10%或20%的溶液后，再按需要量加入已制备好的生理盐水溶液中，以免产生不溶解的磷酸钙沉淀而使溶液混浊。葡萄糖可不用，因为加入葡萄糖的任氏液不能久贮。 (2)生理盐水的配制 取6～7克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，再加蒸馏水到1000毫升，搅匀即可使用，所用蒸馏水要清新且pH值在7.2～7.8。     4. 蛙脑垂体的摘取及脑垂体混悬液的制作 (1)蛙脑垂体的摘取 脑垂体位于蛙脑的底部，隐藏于蝶骨的蝶鞍中，须认真细致方能取出完整的脑垂体。先用尖剪子从蛙颚骨插进嘴里，将嘴两边分别剪至鼓膜后面，再横着将蛙头剪下，随即把口腔上颚的皮肤翻起，用小剪子从枕骨大孔向眼窝前侧斜剪两刀。将斜剪成的三角骨片翻折。用镊子将骨片提起，即可在脑腹面视神经交叉后面见到有一堆白色的东西，其中有一粉红色、约半粒芝麻大的颗粒(有时黏附在翻起来的骨片上)，这就是脑垂体。可用镊子小心地取下整个脑垂体备用，或放在冰箱(温度在4℃左右)保存，如果放在丙酮中，可保持1年以上。 (2)脑垂体混悬液的制作 将所需数量的脑垂体，放入盛有任氏液或生理盐水(0.7%)的玻璃皿中。先用注射器(不套针头)将脑垂体和水一起吸入注射器中，然后套上中号针头，把注射器内的脑垂体挤出，即可使脑垂体破碎。再换上口径更小的针头，把垂体碎片和水吸入后又挤出来，如此反复多次，就制成脑垂体混悬液，可供注射使用。采用这种方法制作脑垂体混悬液比较简便易行。如果需要量大，也可用组织匀浆器研磨。     5. 注射方法与部位     石蛙人工催产注射部位，主要在亲蛙臂部肌内、腹腔和腹部皮下等部位。注射器必须经过严格消毒，注射用的针头以小号的为好，用注射器吸取注射液，然后进行皮下注射或腿部肌肉注射。腹腔注射难度较大，进针深度不要刺得很深，以免剌伤内脏。最好是针头从大腿腹面的肌肉刺入，再伸向腹腔，这样一般不会刺伤内脏，同时，在针头拔出后，药液也不至于从注射孔倒流至体外。     (1)腿部肌肉注射 用镊子夹住大腿背部内侧肌肉厚实处，以45度角入针0.6～0.8厘米，然后慢慢推针，毕后拔针时，要用手轻轻揉擦针尖入口处，以免药液溢出。由于大腿皮肤较容易愈合，不易引起感染。因此，采取这种注射法效果比较理想。 (2)腹部皮下注射 操作时须两人合作：一人捉住亲蛙，使其腹部朝上；另一人用镊子夹住腹部表皮向上轻提，另一手持注射器注射，针头朝向头部，与蛙腹面呈30度角进针，深度以不刺入腹部肌肉为宜。 (3)腹腔注射 一人捉住亲蛙使腹部朝上，另一人在腹部中线偏左或偏右1厘米处呈45度角斜插进针，以刚穿过腹部肌肉为宜，注意不能刺伤内脏。注射完毕用手捏住针孔处皮肤慢慢拔出针头，并轻轻揉搓针孔，以免药液溢出。     人工催产注射时间，通常选择在15︰00～17︰00进行。亲蛙注射后，要暂放桶中片刻，然后按雌雄比例1︰1投放到准备好的产卵池内让其自行发情产卵。当水温为18～22℃时，注射后14～18个小时，亲蛙便开始抱对产卵，这种情况与自然产卵的时间基本一致。但也有亲蛙由于性腺发育不一，因而药物反应时间有长有短，有的亲蛙注射后2～3天仍有抱对现象。出现这种异常是由于亲蛙性腺发育程度较差，卵粒在短时期内难以成熟产出。这类卵子即使产出，其受精率和孵化率往往都比较低，但这并不影响人工催产繁殖的总体效果。     亲蛙注射后经48个小时如不见抱对产卵，可用手挤压腹部，要是泄殖腔仍无卵粒流出，则需做第二次注射，但药物用量应酌情减少。 备注 《石蛙高效养殖新技术与实例》

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